Профилактика Мегамин Мегамин и спорт Исследования Применения Публикации Отзывы Магазин Контакты Где купить О проекте Вопросы к доктору О духовном
Эффект действия Мегамина на раковые клетки in vitro
Отделение Исследований и Разработок “Молекутек Корпорейшн”
6512 Сеговия № 317 Голета, 93117 Калифорния
и
Калифорнийский Университет
Санта Барбара, КА, США
Др. Мирослав Колич
Санта Барбара, 15 мая 2000 г.Цель
Цель нашего исследования – оценка эффекта действия Меганина на темп пролиферации (количественный рост) нескольких раковых клеток человека в пробирке.
Материалы и методы
Реагенты. Эксперименты в пробирке производились на трех разновидностях человеческой раковой опухоли: HeLa (рак шейки матки), HT-29 и CaCO-2 ( рак ободочной , толстой кишки).
Клетки рака шейки матки выращивались в RPVI, тогда как клетки рака толстой кишки выращивались в DMEM. Обе культуры содержались в растворе, состоявшим из 10% эмбриональной бычьей сыворотки (ЭБС), 100 U/мл пенициллина и 100мкг/мл стрептомицина. Клетки были помещены в инкубатор с увлажнителем воздуха и температурой 37 градусов по Цельсию и с 5% содержанием двуокиси углерода.
Количественный анализ пролиферации. Чтобы оценить эффект, оказываемый Меганином на рост клеток, их размещали в количестве 2х10 в 5-ой степени на ячейку в четыре слоя на 96 микроячеистых платах. После ночной инкубации мы заменяли эту культуру культурой, до этого обработанной Мегамином с различной степенью концентрации. Культура питалась Мегамином с концентрацией 0.5, 5.0 и 50.0 в продолжении 18 часов с непрерывным механическим встряхиванием. После инкубации вещество было гранулировано на центрифуге (5000 г), тогда как культура (плавающая на поверхности) была стерилизована путем фильтрования сквозь 0.45 мкм миллипористые фильтры. Чтобы оценить рост клеток, после 72 часового периода инкубации культуры в Мегамине применялся тест МТТ ( голубой тиазол)а Количественный анализ с помощью МТТ определяет активность дегидрогенизации в жизнеспособных клетках. Для этой цели культура, обработанная Мегамином, добавлялась в каждую ячейку в концентрации 20 мкг/мкл. После 4-х часов инкубации осадок растворялся в 160 мкл диметил-сульфооксида. Поглощение измерялось на ридере ЭЛИСА с шкалой 570 нан. Пролиферация клетки выражалась как соотношение в процентах между клеточной жизнеспособностью клеток, обработанных до этого Меганином, и контрольных клеток (не обработанных).
Результаты
Эффект действия Мегамина был испытан на трех разновидностях человеческих раковых клеток: HeLa, CaCO-2 и HT-29. Когда Мегамин добавлялся прямо к растущим клеткам никакого эффекта на рамножение клеток не наблюдалось при концентрации в диапазоне 10 в–6 до 10 в –2, однако, рост торможения дрматически уменьшался в зависимости от вариации доз в пределах от 10 в –2 до 10 в квадрате данные не приводятся). Гибель клетки происходила возможно из-за нерастворитмости в растворе, который физически повреждал клетки, когда добавлялся к культуре в высокой степени концентрации. По этой причине при более поздних экспериментах клетки инкубировались с культурой, прежде обработанной Мегамином в течение 24 часов, после чего они посеивались на микротитровые пластинки.
Обобщенные результаты экспериментов приведены на рис. 1. Торможение роста легко различимо на всех трех видах клеток, и при всех трех концентрациях наиболее значительным оно является для клеток HeLa.
Заключение
Рост раковых клеток человека HeLa, CaCO-2 и HT-29 тормозится при лечении Мегамином в индивидуально-зависимых дозах.
Концентрация Мегамина.
Исследования показали, что МЕГАМИН значительно улучшает значения TAS у пациентов со злокачественными опухолями, диабетом, а также у здоровых людей. Употребляемый в комбинации с классической химиотерапией МЕГАМИН улучшает на 25-35% следующие показатели:
- аспартатаминотрансферазу;
- аланинсминотрансферазу;
- лактатдегидрогеназу;
- щелочную фосфатазу;
- количество лейкоцитов;
- количество эритроцитов;
- количество тромбоцитов;
- уровень содержания железа;
- СОЭ;
Тестовые исследования выполнялись в поликлиниках Свечняк в Загребе и ВИТА НОВА в Умаге под контролем д-ра Славко Ивковича в течение 5 месяцев. К исследованиям было привлечено 280 пациентов.
У 21 пациента наблюдались церебральные опухоли в заключительной стадии. Пациенты находились в неудовлетворительном общем состоянии, были неподвижны и подвергались исключительно симптоматической терапии, т.е. получали только обезболевающие и антидепрессивные средства. Через 3-4 недели после начала приема МЕГАМИНА у большинства пациентов произошло существенное улучшение общего состояния, прекратились эпилептические приступы, они стали подвижнее, у некоторых появилась возможность самостоятельно читать, умываться и поддерживать нормальные контакты с окружающими. Через 5 недель у 14 пациентов больше уже не было признаков ракового заболевания.
У 40 пациентов с первичными опухолями в легких в заключительной стадии общее состояние заметно улучшилось в течение 3-4 недель после начала приема. Боли заметно уменьшились, дыхание и подвижность стали свободными. В этой группе умер только один пациент с кахексией.
Далее, производилось клиническое наблюдение за воздействием МЕГАМИНА на протекание болезни у 53 пациентов в исключительно кахектическом состоянии с поражением раком пищеварительного тракта в заключительной стадии. У этих пациентов позитивное действие наступило несколько позже (с 5 по 7 неделю), при этом 4 пациента скончались в начальной фазе приема МЕГАМИНА. Остальные пациенты показали позитивную динамику и через 5 месяцев лишь у некоторых сохранились симптомы заболевания.
Более чем у 150 пациентов был зафиксирован явно позитивный эффект от приёма МЕГАМИНА в сочетании с классическими терапевтическими методами (химиотерапия, лучевая терапия). При этом уменьшились побочные явления, вызываемые классическими методами лечения.
Таким образом, МЕГАМИН можно применять как добавку и/или общеукрепляющее средство для поддержания основной терапии с целью улучшения общего состояния при лечении и реабилитации тяжелых хронических и раковых заболеваний.
